è¾£æ ¹éŽæ°§åŒ–物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)具有分åé‡å°ï¼Œæ¨™è¨˜æ–¹æ³•簡單,性質穩定ç‰å„ªé»žï¼Œæ˜¯è‡¨åºŠæª¢é©—試劑ä¸å¸¸ç”¨çš„酶。該產å“廣泛用于å„é¡žç”ŸåŒ–æª¢æ¸¬é …ç›®åŠå…疫類(ELISA)試劑盒。ä¸è¯è©¦åŠ‘ç¶²è¾£æ ¹éŽæ°§åŒ–物酶的底物種類è±å¯Œï¼Œå¯æ»¿è¶³ä¸åŒçš„實驗需求。
■HRP的發色底物
è¾£æ ¹éŽæ°§åŒ–ç‰©é…¶ç™¼è‰²åº•ç‰©ç‚ºéŽæ°§åŒ–物和供氫體(DH2),其真æ£åº•物是H2O2,但人們習慣把供氫體稱為底物或統稱供氫體底物。在ELISAä¸å¸¸ç”¨çš„供氫體有以下幾種:
1ã€OPD是ELISAæŠ€è¡“ä¸æ‡‰ç”¨è¼ƒå¤šçš„供氫體,酶作用åŽé¡¯é»ƒè‰²ï¼ˆæœ€å¤§å¸æ”¶æ³¢é•·ç‚º492 nmï¼‰ï¼Œå…¶éˆæ•度高,測定方便。
2ã€TMB是近年來常用的一種供氫底物,經酶作用åŽé¡¯å¤©è—è‰²ï¼Œç›®æ¸¬å°æ¯”åº¦é®®æ˜Žï¼ŒåŠ é…¸çµ‚æ¢é…¶å應åŽè®Šé»ƒè‰²ï¼ˆæœ€å¤§å¸æ”¶æ³¢é•·ç‚º450 nmï¼‰ï¼Œæ˜“æ¯”è‰²å®šé‡æ¸¬å®šã€‚
3ã€DBAä¾›æ°«åº•ç‰©ï¼Œå…¶åæ‡‰ç”¢ç‰©ç‚ºä¸èƒ½æº¶è§£çš„æ£•色å©å—ªè¡ç”Ÿç‰©ï¼Œå¯ç”¨ä¸åŒå…‰é¡è§€å¯Ÿã€‚æ¤ç¨®å¤šèšç‰©èƒ½è¢«é‚„原和螯åˆå››æ°¯åŒ–碳,形æˆå…·æœ‰é›»å密度的產物,便于用電é¡è§€å¯Ÿã€‚
䏿–‡å稱
|
英文å稱
|
忇‰ç”¢ç‰©
|
CAS
|
包è£
|
鄰苯二胺
|
o-Phenylenediamine, OPD, 99.5%
|
黃色ã€å¯æº¶æ€§
|
|
100 g
500 g
|
3,3',5,5'-四甲基è¯è‹¯èƒº
|
3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, TMB, 99%
|
è—色(黃色)ã€å¯æº¶æ€§
|
|
1 g
5 g
|
3,3'-二氨基è¯è‹¯èƒº
|
3,3'-Diaminobenzidine, DAB, 99%
|
棕色ã€ä¸æº¶æ€§
|
|
25 g
100 g
|
è¯è‹¯èƒº
|
Benzidine, 95%
|
è—色ã€ä¸æº¶æ€§
|
|
25 g
250 g
|
四甲基è¯è‹¯èƒºç¡«é…¸é¹½
|
N-(3-Sulfopropyl)-3,3',5,5-tetramethylbenzidine,sodium salt, TMB-PS, 99%
|
è—色ã€å¯æº¶æ€§
|
|
5 g
25 g
|
5-氨基水楊酸
|
5-Aminosalicylic acid, 98.5%
|
棕色ã€å¯æº¶æ€§
|
|
25 g
100 g
500 g
|
2,2'-二氮-雙(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)銨鹽
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Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid-2NH4-salt
|
ç¶ è‰²ã€å¯æº¶æ€§
|
30931-67-0 |
1 g
|
3-氨基-9-乙基咔唑
|
3-Amino-9-ethylcarbazole, AEC
|
紅色ã€å¯æº¶æ€§
|
132-32-1 |
5 g
25 g
|
4-æ°¯-1è˜é…š
|
Chloro-1-naphthol
|
è—色ã€å¯æº¶æ€§
|
604-44-4 |
25 g
|
※ å°è²¼å£«ï¼šæ°§åŒ–物ã€ç¡«åŒ–ç‰©ã€æ°ŸåŒ–物åŠç–Šæ°®åŒ–物ç‰å¯æŠ‘制HRP的活性,故勿用這類試劑作為防è…劑。
■HRP的發光底物
é¯ç±³è«¾ï¼ˆ3-氨基鄰苯二甲酰肼,Luminol)或其è¡ç”Ÿç‰©å¦‚ç•°é¯ç±³è«¾ï¼ˆ4-氨基鄰苯二甲酰肼,Isoluminol),是一類é‡è¦çš„發光試劑。用HRP標記抗體,進行å…ç–«åæ‡‰åŽï¼Œåˆ©ç”¨é¯ç±³è«¾ä½œç‚ºç™¼å…‰åº•物,在HRP和起動發光試劑(NaOH+H2O2)作用下,é¯ç±³è«¾ç™¼å…‰ï¼Œç™¼å…‰å¼·åº¦ä¾è³´äºŽé…¶å…ç–«åæ‡‰ç‰©ä¸é…¶çš„æ¿ƒåº¦ã€‚忇‰éŽç¨‹å¦‚下圖所示:

產å“編號
|
䏿–‡å稱
|
英文å稱
|
CAS
|
純度
|
包è£
|
328061
|
é¯ç±³è«¾
|
Luminol
|
|
98%
|
1 g
5 g
25 g
|
分åå¼ï¼šC8H7N3O2
分åé‡ï¼š433.63
熔點:194-195℃
å„²å˜æ¢ä»¶ï¼š 2-8°C
|
|
產å“編號
|
䏿–‡å稱
|
英文å稱
|
CAS號
|
純度
|
包è£
|
A5300
|
ç•°é¯ç±³è«¾
|
Isoluminol
|
3682-14-2 |
98%
|
1 g
10 g
|
分åå¼ï¼šC8H7N3O2
分åé‡ï¼š177.16
熔點:194-195℃
å„²å˜æ¢ä»¶ï¼š 2-8°C
|
|
â– é…套產å“
䏿–‡å稱
|
英文å稱
|
CAS號
|
純度
|
包è£
|
4-碘苯酚
|
4-Iodophenol
|
|
99%
|
5 g
25 g
100 g
|
四苯基硼酸鈉
|
Sodium tetraphenylborate
|
|
99.5%(ACS)
|
25 g
100 g
500 g
|
牛血清白蛋白
|
Bovine serum albumin [ Fraction V], BSA
|
|
——
|
5 g
25 g
100 g
|
å二烷基硫酸鈉
|
Dodecyl sulfate sodium salt, SDS
|
|
99%
|
100 g
500 g
|
脫氧膽酸鈉
|
Sodium deoxycholate
|
|
98%
|
25 g
100 g
500 g
|
苯甲基磺酰氟化物
|
Phenylmethylsulfonyl fluoride, PMSF
|
|
99%
|
25 g
100 g
|
亮抑酶肽
|
Leupeptin
|
|
96.5%
|
10 mg
50 mg
|
三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽
|
Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, Tris-HCl
|
|
99%
|
25 g
100 g
500 g
|
åæº«80
|
Polysorbate 80
|
|
——
|
250 mL
1 L
|